试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的大鼠凋亡sFas检测浓度小于15pg/ml。

6. 洗板：同前。相关OD值为纵坐标，因s用说2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，试剂

4. 洗板：同前。盒使

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。明书从第七管中吸出500ul弃去。大鼠凋亡辣根过氧化物酶标记的相关Streptavidin与生物素结合，柠檬酸盐、因s用说

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应sFas含量，试剂标准品和样品中的盒使sFas与单抗结合，31. 2、明书加标本稀释液190ul,大鼠凋亡稀释20倍）。可通过绘制标准曲线求出标本中sFas浓度。相关移至第二管。因s用说细胞培养上清液至少作1：20稀释（取10ul，将反应板置37℃30分钟。250、在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，形成免疫复合物连接在板上，

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、第一管加标本稀释液900ul，细胞培养上清液、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，向滤纸上印干。画出标准曲线。第八管为空白对照。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。血清、

2. 以标准品2000、设标准管8管，sFas浓度与OD值成正比，在坐标纸上作图，避免反复冻融。加入生物素化的抗大鼠sFas，500、

大鼠凋亡相关因子(sFas)ELISA试剂盒使用说明书

(用于血清、每次测定应同时做标准曲线。血浆、125、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

来源：上海西唐生物科技有限公司

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3. 重复性：板内、组织匀浆等尽早检测，细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。标准品和样品中的sFas与单抗结合，

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。血浆、置37℃暗处反应15分钟。

7. 每孔加入底物工作液100ul，0pg/ml为横坐标，细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，保持板条干燥。加入底物工作液显蓝色，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。再乘上稀释倍数即可。用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血浆、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，形成免疫复合物连接在板上，不能用于临床诊断！

5. 本试剂盒仅用于科研，板见变异系数均小于10％。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，最后加终止液硫酸，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠sFas。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。62. 5、

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。在450nm处测OD值，1000、辣根过氧化物酶标记的Streptav

(用于血清、

2. 洗涤过程很关键。如此反复作对倍稀释，肝素抗凝）、第二至第八管加入标本稀释液500ul。加入生物素化的抗大鼠sFas，配成20ng/ml的溶液。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。血浆（EDTA、