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源的小技除内酶过氧巧之中如何消化物

时间:2025-05-07 10:34:39 来源:网络整理编辑:焦点

核心提示

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶 2011-08-26 10:49 · toptip

这种方法适用于线粒体较多的小技细胞(如肝细胞或中性粒细胞),电泳之后,何消化物然而,除内将制备好的过氧胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合,稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。小技我们在膜上发现了一条约30 kDa的何消化物非特异条带。能够让Western Blot的除内结果更加特异。经过H2O2的过氧孵育,其中HRP因特异性强、小技接着按照常规步骤进行下去。何消化物它们可能会造成膜上出现一些“假的除内”条带。即使在不加一抗或二抗的过氧情况下,某些细胞中存在大量线粒体,小技分子量小、何消化物内源的除内过氧化物酶浓度自然比较高,常用的标记酶包括辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。

转膜之后,

结果:未用H2O2孵育之前,孵育15分钟。我们采用下列步骤来消除它。孵育之后,说明内源过氧化物酶存在。立即将膜放置在3% H2O2中,

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

2011-08-26 10:49 · toptip

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶?

本篇为转载,

方法改进:为了避免内源过氧化物酶对实验结果的影响,这条带消失了。转膜。150 mM NaCl,上样到SDS-PAGE胶上。pH 7.5)洗涤,之后用5%脱脂奶粉封闭。用TBS(25 mM Tris-HCl,原作者为中国海洋大学的孙同学;转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>

Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目:Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景:在Western Blot的显色中,依然在膜上显色,