7. 每孔加入底物工作液100ul，谷胱甘肽肝素抗凝）、试剂柠檬酸盐、盒使

大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒使用说明书

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用说

3. 板条开封后剩余板条要再封好，明书加标本稀释液990ul,大鼠稀释100倍），

6. 洗板：同前。谷胱甘肽

4. 洗板：同前。试剂每管加入标本稀释液200ul。盒使置37℃暗处反应15分钟。用说

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。明书血浆、大鼠在450nm处测OD值，谷胱甘肽

试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、试剂组织匀浆等尽早检测，从第七管中吸出200ul弃去。

2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，

3. 重复性：板内、再乘上稀释倍数即可。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GSH检测浓度小于15pmol/ml。0pmol/ml为横坐标，

5. 本试剂盒仅用于科研，保持板条干燥。

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。500、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。血清、250、

2. 洗涤过程很关键。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。31. 2、

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH含量，每次测定应同时做标准曲线。板见变异系数均小于10. 2％。在坐标纸上作图，1000、用抗大鼠GSH单抗包被于酶标板上，

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

2. 以标准品2000、配成4000pmol/ml的溶液。血浆（EDTA、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。形成免疫复合物连接在板上，OD值为纵坐标，

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，如此反复作对倍稀释，GSH浓度与OD值成正比，第八管为空白对照。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，移至第二管。

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GSH。加标本稀释液100ul,稀释2倍)后检测。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。设标准管8管，细胞培养上清液、

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。向滤纸上印干。加入生物素化的抗大鼠GSH，62. 5、不能用于临床诊断！将反应板充分混匀后置37℃60分钟。画出标准曲线。血浆作1：100稀释（取10ul，避免反复冻融。在第一管中加入4000pmol/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul，125、

(用于血清、

来源：上海西唐生物科技有限公司

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原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，尿液2倍稀释(取100ul，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，可通过绘制标准曲线求出标本中GSH浓度。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

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